ISOZIM MERUPAKAN BENTUK YANG MEMPUNYAI PERBEDAAN FISIK TETAPI DENGAN AKTIVITAS KATALISIS YANG SAMA

Read Also

Kalau teknik pemurnian enzim diaplikasikan, sebagai contoh kepada enzim malat dehidrogenase yang berasal dari sumber yang berbeda (misal, hati tikus dan escherichia coli), kita akan melihat dengan jelas bahwa sekalipun enzim malat dehidrogenae yang berasal dari hati tikus maupun E coli akan mengatalisis reaksi yang sama, sifat-sifat fisik dan kimiamereka memperlihatkan banyak perbedaan bemakna. Bnetuk – bentuk fisik berbeda dari aktivitas yang ama juga dapat ditemukan dalam berbagai jaringan organisme yang sama, dalam tipe-tipe sel yang berbeda, dalam kompartemen sunselular, atau dalam organisme prokaryotik seperti E coli. Temuan ini diperoleh sebagai hasil penerapan prosedur pemisahan elektroforentik pada pemisahan bentuk-bentuk aktivitas enzimatik tertentu yang berbeda secara elektroforetis.

Pemisahan dan Identifikasi Isoenzim memiliki Nilai Diagnostik

Isozim laktat dehidrogenase dalam serum dapat dilihat dengan melakukan elektroforesis terhadap sampel serum pada bahan penyangga pati, agar atau gel poliakrilamoda, yang biasanya dilakukan dengan PH 8,6. isozim tersebut mempunyai muatan yang belainan pada pH 8,6 ini dan bermigrasi menuju lima daerah yang berlainan pada elektoferogram. Isozim tersebut dideteksi berdasarkan kemampuan masing –masing isozim. Mengatalisis proses reaksi suatu zat pewarna yang tidak berwarna menjadi bentuk yang berwarna dan tidak larut.

Campuran Assay dehidrogenase tipikal mengandung NAD+ suatu substrat terteduksi , bentuk teroksidasi zat pewarna redoks seperti nitroblue tetrazolium (NBT), pembawa (carrier) electron intermediet yang diperlukan bagi pemindahan elektron dari NADH ke NBT, serta pendapat serta ion pengaktif jika dibutuhk

Isozim merupakan produk dari gen yang berkerabaterat.

Enzim oligomerik dengan protomer yang tidak sama bisa terdapat. Yang sering, satu jaringan mengahsilkan terutama satu jenis protomer, sementara jaringan lain menghasilkan protomer lain. Bila protomer-protomer ini dapat brgabung melalui berbagai cara untuk membangun sebuah enzim yang aktif (misal, tetramer), terbentuklah isozim dengan aktifitas enzimatik tersebut.

Isozim laktat dehidrogenase memiliki perbedaan pada tingkat stuktur kuanternernya. Molekul oligomerik laktat dehidrogenase stuktur kuanternernya. Molekul oligomerik laktat dehidrogenase (berat molekul 130.000) terdiri atas empat protomer dengan dua tipe, yaitu tipe H dan M (berat molekul sekitar 34.000). hanya molekul tetramiklah yang mempunyai aktivitas katalitik. Jika urutan tidak penting, protomer ini dapt dikambinasikan melaLui cara berikut :

HHHH

HHHM

HHMM

HMMM

MMMM

Markert telah menggunakan sejumlah kondisi yang diketahui dapat membongkar dan membentuk kembali struktur kuanterner untuk menerangkan hubungan antar isozim laktat dehidrogenase. Pemecahan dan pembentukan kembali laktat dehidrogenase –I₁ atatu laktat dehidrogenase –I₅ homogen tidak emnghasilkan isozim yang baru.