Neisseria Gonorrhoeae - Diagnosis Laboratorium

Read Also

• Neisseria gonorrhoeae adalah patogen manusia obligat dan merupakan agen etiologi gonore.

• Di Amerika Serikat, ini adalah penyakit menular kedua yang paling sering dilaporkan, dengan lebih dari 350.000 kasus dilaporkan setiap tahun.

• Sindrom termasuk servisitis pada wanita dan uretritis, faringitis dan proktitis pada kedua jenis kelamin. Jika tidak diobati, wanita dapat mengalami gejala sisa yang parah dari penyakit radang panggul, nyeri panggul kronis, kehamilan ektopik, dan infertilitas tuba, sementara pria dapat mengembangkan epididimitis, prostatitis, dan striktur uretra.

Diagnosis Laboratorium Neisseria gonorrhoeae

A. Pilihan dan koleksi spesimen

Pilihan spesimen dan metode pengumpulan tergantung pada teknik pengujian yang digunakan di laboratorium dan usia, jenis kelamin dan orientasi seksual pasien.

• Uretra: Keluarkan eksudat uretra saat pasien mengeluarkan cairan. Jika tidak ada sekret, tekan meatus secara vertikal untuk membuka uretra distal dan masukkan swab tipis yang dibasahi air (kalsium alginat atau Dacron) dengan kawat fleksibel secara perlahan (3 cm sampai 4 cm pada laki-laki atau 1 cm sampai 2 cm pada perempuan), putar perlahan dan tarik perlahan.

• Urine: Minta pasien untuk mengumpulkan hanya 10 mL hingga 15 mL urin pertama. Pasien tidak boleh berkemih setidaknya 2 jam sebelum pengambilan spesimen untuk meningkatkan kemungkinan mendeteksi organisme.

• Serviks: Masukkan spekulum ke dalam vagina untuk melihat serviks. Masukkan swab 1 cm hingga 3 cm ke dalam saluran endoserviks dan putar selama 10 detik hingga 30 detik untuk memungkinkan penyerapan eksudat.

• Vagina: Kumpulkan sekret vagina yang terkumpul, jika ada. Spesimen cuci vagina paling disukai dan dapat diterima oleh anak perempuan pra-pubertas. Jika tidak memungkinkan, gosokkan cotton bud steril pada dinding posterior vagina dan biarkan swab menyerap spesimen.

• Rektal: Spesimen dapat diperoleh secara membabi buta atau, lebih disukai, melalui anoscope. Masukkan swab 2 cm sampai 3 cm ke dalam lubang anus. Menghindari bahan feses, putar ke kriptus sampel tepat di dalam cincin anus; biarkan swab menyerap spesimen selama 10 detik.

• Orofaringeal: Gosokkan swab steril di atas faring posterior dan kripta tonsil, atau dapatkan aspirasi nasofaring dari bayi.

• Konjungtiva: Setiap eksudat atau nanah yang ada di mata harus dikeluarkan dengan hati-hati dengan swab steril. Usap kedua yang dibasahi dengan garam harus digunakan untuk menggosok konjungtiva yang terkena. Usap ini harus dipecah menjadi botol media transportasi.

• Cairan tubuh steril: Bersihkan tempat tusukan kulit dengan yodium (1% hingga 2%, atau 10% larutan povidone-iodine [1% bebas yodium]). Jika tingtur yodium digunakan, hilangkan dengan etanol 70% untuk menghindari luka bakar. Lakukan aspirasi perkutan untuk cairan pleura, perikardial, peritoneal atau sinovial. Gunakan koleksi non-heparin jika memungkinkan.

B. Transportasi

• Untuk meminimalkan efek penghambatan zat yang tidak diketahui dalam spesimen, swab harus diinokulasi langsung ke media pertumbuhan atau ditempatkan di media transportasi swab segera setelah pengambilan sampel.

• Jika media yang diinokulasi sedang diangkut ke laboratorium lokal, pelat harus disimpan pada suhu kamar tidak lebih dari 5 jam dalam atmosfer yang diperkaya CO2 menggunakan toples lilin atau sistem penghasil CO2 komersial.

• Jika pengiriman jarak jauh diperlukan, spesimen harus diinokulasi ke media yang terkandung dalam sistem penghasil CO2, diinkubasi selama 18 jam hingga 24 jam dan memiliki pertumbuhan yang terlihat di piring sebelum pengiriman.

C. Mikroskop

• Apusan langsung untuk pewarnaan Gram dapat dilakukan segera setelah spesimen swab diambil dari uretra, serviks, vagina atau rektum.

• Pewarnaan Gram dari apusan eksudat uretra atau sekret endoserviks menunjukkan diplokokus intraseluler Gram-negatif, non-motil yang khas.

D. Kultur

• Metode laboratorium yang disukai saat ini untuk diagnosis infeksi N. gonorrhoeae adalah isolasi dan identifikasi agen.

• Spesimen primer harus diinokulasi pada agar coklat nonselektif dan agar selektif yang mengandung bahan antimikroba yang menghambat pertumbuhan bakteri dan jamur komensal.

• Media pertumbuhan:

• Media Thayer Martin yang dimodifikasi (Agar cokelat yang mengandung antibiotik (vankomisin, kolistin, trimetoprim, dan nistatin)) paling sering digunakan.

• Modified Newyork City Medium (MNC) juga digunakan untuk kultur Neisseria gonorrhoeae.

• Pelat yang diinokulasi harus diinkubasi pada suhu 35 ° C hingga 37 ° C dalam atmosfer lembab yang diperkaya dengan CO2 (3% hingga 7%).

• Kultur 18 jam sampai 24 jam harus digunakan sebagai inokulum untuk tes tambahan.

• Catatan: Pelat tidak boleh diinkubasi lebih dari 48 jam karena sebagian besar kultur lama tidak akan bertahan dalam kondisi penyimpanan. Autolisis dapat terjadi selama inkubasi yang lama, dan pertumbuhan dari pelat agar menjadi sulit untuk disuspensikan dalam larutan.

• Isolat harus disubkultur setidaknya sekali pada media nonselektif setelah isolasi awal sebelum digunakan dalam uji diagnostik yang membutuhkan kultur murni atau inokulum berat.

Identifikasi dugaan:

• Identifikasi dugaan N. gonorrhoeae didasarkan pada isolasi diplokokus Gram-negatif, katalase-positif, katalase-positif yang diperoleh dari situs urogenital yang tumbuh pada media selektif.

 

Tes konfirmasi

Tes konfirmasi meliputi tes biokimia, tes substrat enzim chromogenic, immunoassays dan metode asam nukleat.

Reaksi biokimia:

• Uji Oksidase: Positif

• Memfermentasi glukosa tetapi bukan maltosa, sukrosa atau laktosa

• Tes DNAse: Negatif

• Uji Beta-galaktosidase (ONPG): Negatif

• Tes Glutamil-aminopeptidase (GAP): Negatif

• Uji substrat enzim:

• Hidroksiprolilaminopeptidase positif

 

Pengujian Kerentanan Antimikroba

• Pemantauan kerentanan antimikroba N. gonorrhoeae penting untuk menyelidiki kegagalan pengobatan dan untuk mengevaluasi kemanjuran terapi yang direkomendasikan saat ini.

• Resistensi antibiotik pada Neisseria gonorrhoeae sangat mengganggu keberhasilan pengobatan gonore.

• Penisilin, tetrasiklin, dan makrolida yang lebih baru memiliki kegunaan yang terbatas, dan spektinomisin (dan di banyak bagian dunia, kuinolon) telah ditarik karena resistensi.

• Dari pengobatan yang biasanya direkomendasikan, hanya sefalosporin generasi ketiga, dan terutama seftriakson yang mempertahankan kemanjurannya, tetapi penurunan kerentanan terhadap antibiotik ini juga muncul.

Perlakuan

• Perawatan saat ini yang direkomendasikan oleh CDC adalah terapi antibiotik ganda.

• Ini termasuk dosis tunggal ceftriaxone (sefalosporin generasi ketiga) yang disuntikkan bersama dengan azitromisin yang diberikan secara oral. Azitromisin lebih disukai untuk cakupan tambahan gonore yang mungkin resisten terhadap sefalosporin tetapi rentan terhadap makrolida.

• Pasangan seksual (didefinisikan oleh CDC sebagai kontak seksual dalam 60 hari terakhir) juga harus diberitahu, diuji, dan diobati.

• Penting bahwa jika gejala berlanjut setelah menerima pengobatan infeksi N. gonorrhoeae, evaluasi ulang harus dilakukan.

Pencegahan Infeksi

• Penularan dapat dikurangi dengan menggunakan penghalang lateks (misalnya kondom atau bendungan gigi) saat berhubungan seks dan dengan membatasi pasangan seksual.

• Kondom dan bendungan gigi juga harus digunakan selama seks oral dan anal.

• Menghindari hubungan seksual

• Memiliki pasangan monogami seksual yang tidak memiliki infeksi

• Untuk meminimalkan risiko penularan gonore kepada orang lain, hindari melakukan hubungan seksual setidaknya selama tujuh hari setelah pengobatan selesai.